ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಎಲಿಸಾ ಕಿಟ್

ವಿವರಣೆ

 

ಪರೀಕ್ಷಾ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

 

ಹಂತ 1 ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ

1.1 ವಾಶ್ ಪರಿಹಾರ ತಯಾರಿಕೆ

Wಏಕಾಗ್ರತೆ wದ್ರವ ದ್ರವ:ಬಳಕೆಯ ಮೊದಲು, ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ (20-25 ಪದವಿ) ಪುನಃಸ್ಥಾಪಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಸಮವಸ್ತ್ರ ಮಾಡಲು ಸಮವಾಗಿ ಅಲುಗಾಡಬೇಕು . ನಂತರ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು 20 ಪಟ್ಟು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಬೇಕು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 5 ಮಿಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು 95 ಮಿಲಿ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ), ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ, ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ, ಮತ್ತು ದುರ್ಬಲವಾದ ತೊಳೆಯುವಿಕೆಯು

1.2 ಮಾದರಿ ತಯಾರಿಕೆ

-ಹೋಲ್ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ರಕ್ತವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ, 4000 ಆರ್‌ಪಿಎಂನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಸೂಪರ್‌ನೇಟೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ . ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಇಲ್ಲದೆ ಸ್ವಾಭಾವಿಕವಾಗಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಬಹುದು .

The ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯವು ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಮಾದರಿ ಗಾತ್ರವು ದೊಡ್ಡದಾಗಿದೆ . ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಆಂಟಿಬಾಡಿ ವರ್ಕಿಂಗ್ ದ್ರಾವಣದೊಂದಿಗೆ 1: 1 ರಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ ತಟ್ಟೆಯಲ್ಲಿ ಬೆರೆಸಿ (70ul ಸೀರಮ್ ಸ್ಯಾಂಪಲ್ + 70 ಉಲ್ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಕಾರ್ಯ

1.3 ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ

"ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲ್ ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ (ಮಾದರಿಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಹಲವಾರು ಬಾರಿ ಡಿಸ್ಅಸೆಂಬಲ್ ಮಾಡಬಹುದು ಮತ್ತು ಬಳಸಬಹುದು), ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಗಾಗಿ ತಲಾ ಎರಡು ಬಾವಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಸಿ, ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್ಡ್ ಮಿಶ್ರಣದ 100 ಯುಎಲ್ ಅನ್ನು ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲ್ ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ಗೆ ಸೇರಿಸಿ . ನಿಮಿಷಗಳು .

ಸೀಲಿಂಗ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಫಿಲ್ಮ್ ಅನ್ನು ತೆರೆಯಿರಿ, ಪ್ಲೇಟ್ ಬಾವಿಯಲ್ಲಿ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ, ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 300µl ಕೆಲಸದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ದ್ರವವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ತದನಂತರ ದ್ರವವನ್ನು ಬಾವಿಯಲ್ಲಿ ತ್ಯಜಿಸಿ {ಮೇಲಿನ ಹಂತಗಳನ್ನು 5 ಬಾರಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ, ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಸ್ವಚ್ halled ವಾದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದದ ಮೇಲೆ ಒಣಗಿಸಿ .}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}

③Dಕಿಣ್ವ ಕಾಂಜುಗೇಟ್:ಕಿಣ್ವ ಕಾಂಜುಗೇಟ್ (50 ×) ಅನ್ನು 50 ಬಾರಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ: 20 ಯುಎಲ್ ಕಿಣ್ವ ಕಾಂಜುಗೇಟ್ ಸಾಂದ್ರತೆ + 980 ಉಲ್ ಡಿಲ್ಯುಯೆಂಟ್ 1, ಅಗತ್ಯವಿರುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೊತ್ತವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ), ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಪಕ್ಕಕ್ಕೆ ಇರಿಸಿ .}}}}}}}}}}}}}}}}

Welly 100µl ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ ಸೇರಿಸಿ, ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ, ಮತ್ತು 37 ಡಿಗ್ರಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ .

ಕಿಣ್ವ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ವಾಶ್ ಮಾಡುವುದು, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯು ಮೇಲಿನ {. ನಂತೆಯೇ ಇರುತ್ತದೆ

Well ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 100µl ತಲಾಧಾರದ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ ಮತ್ತು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 37 ಡಿಗ್ರಿ ದೂರದಲ್ಲಿ ಬೆಳಕಿನಿಂದ ಕಾವುಕೊಡಿ .

Well ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 50µl ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು 5 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ನಿರ್ಧರಿಸಿ .

 

ಹಂತ 2 ಫಲಿತಾಂಶದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

 

ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಯ OD450 ಮೌಲ್ಯವನ್ನು 96- ಬಾವಿ ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್ . ನಲ್ಲಿ ಓದಲಾಗುತ್ತದೆ

2.1 ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ

 

ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಸರಾಸರಿ OD450NM ಮೌಲ್ಯ <0 . 35 ಮತ್ತು negative ಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ/ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಸರಾಸರಿ OD450NM ಮೌಲ್ಯವು 3 . 5 ಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾಗಿದೆ ಅಥವಾ ಸಮನಾಗಿತ್ತು, ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮಾನ್ಯವಾಗಿವೆ. ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಬೇಕು.

2.2 ಲೆಕ್ಕಾಚಾರದ ವಿಧಾನ

ಪ್ರತಿ ಸ್ಯಾಂಪಲ್‌ಗೆ, ಸರಿಪಡಿಸಿದ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೈ (ಬ್ಲಾಕಿಂಗ್ ಆರ್ ಎಟಿಇ) ಅನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಿ:

3.3 ಫಲಿತಾಂಶ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

ಪೈ <20%ಬಂದಾಗ, ಅದನ್ನು ನಕಾರಾತ್ಮಕ . ಎಂದು ತೀರ್ಮಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ

Pi> 30%ಆಗಿದ್ದಾಗ, ಅದನ್ನು ಧನಾತ್ಮಕ . ಎಂದು ತೀರ್ಮಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ

30% ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಸಮನಾದ 20% ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಸಮನಾದಾಗ, ಇದನ್ನು ಅನುಮಾನಾಸ್ಪದವೆಂದು ತೀರ್ಮಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಒಂದು ವಾರದ ನಂತರ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲು ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ .

ಹಾಟ್ ಟ್ಯಾಗ್ಗಳು: ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಎಲಿಸಾ ಕಿಟ್, ಚೀನಾ ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಎಲಿಸಾ ಕಿಟ್ ಪೂರೈಕೆದಾರರು, ತಯಾರಕರು, ಕಾರ್ಖಾನೆ