ಪೋರ್ಸಿನ್ ಸರ್ಕೋವೈರಸ್ ಪ್ರಕಾರ-Ⅱ ಪ್ರತಿಕಾಯ ELISA ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್

ಮಾದರಿ ಸಂಖ್ಯೆ:VD510E
Abbr.:PCV-Ⅱ ಅಬ್ ಎಲಿಸಾ
ಮಾದರಿ: ಸೀರಮ್

ವಿಚಾರಣೆ ಕಳುಹಿಸಿ

ವಿವರಣೆ

ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ

PCV-Ⅱ ಅಬ್ ಎಲಿಸಾ

ಉದ್ದೇಶಿತ ಬಳಕೆ:

Porcine Circovirus Type-Ⅱ Antibody ELISA ಡಿಟೆಕ್ಷನ್ ಕಿಟ್ ಹಂದಿಯ ಸೀರಮ್ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ PCV ಪ್ರತಿಕಾಯದ ನಿರ್ಣಯಕ್ಕಾಗಿ. ಹಂದಿ ಸಾಕಣೆ ಕೇಂದ್ರಗಳ ಪೊರ್ಸಿನ್ ಸರ್ಕೋವೈರಸ್ ಪ್ರಕಾರದ-Ⅱ ಲಸಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣೆಯಿಂದ ಲಸಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಮಾದರಿ:ಸೀರಮ್

ಒದಗಿಸಿದ ಸಾಮಗ್ರಿಗಳು:

Porcine Circovirus Type-Ⅱ Antibody ELISA Detection Kit

ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

ಹಂತ 1 ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ

1.1 ವಾಶ್ ಪರಿಹಾರ ತಯಾರಿಕೆ

ಕೆಲಸದ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರವ: ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು, ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ (20-25 ಡಿಗ್ರಿ) ಪುನಃಸ್ಥಾಪಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಏಕರೂಪವಾಗಿಸಲು ಸಮವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಬೇಕು. ನಂತರ 20 ಬಾರಿ ಸಾಂದ್ರೀಕೃತ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 5 ಮಿಲಿ ಸಾಂದ್ರೀಕೃತ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು 95 ಮಿಲಿ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನೀರಿಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ), ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರವವನ್ನು 7 ದಿನಗಳವರೆಗೆ 2-8 ಡಿಗ್ರಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.

1.2 ಮಾದರಿ ತಯಾರಿ

① ಇಡೀ ಪ್ರಾಣಿಯ ರಕ್ತವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ, 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 4000rpm ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸೂಪರ್ನಾಟಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಇಲ್ಲದೆಯೇ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ನೈಸರ್ಗಿಕವಾಗಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಬಹುದು.

② ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು 1:25 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ (5ul ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು 120ul ಮಾದರಿ ಡೈಲ್ಯೂಯೆಂಟ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಿ) ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

ಗಮನಿಸಿ: ಋಣಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಬೇಕಾಗಿಲ್ಲ.

1.3 ಕಿಣ್ವ ಸಂಯೋಜಕ ತಯಾರಿ

ಕಿಣ್ವ ಸಂಯೋಜಕವನ್ನು 1:25 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ (120ul ಕಿಣ್ವದ ದ್ರಾವಕಕ್ಕೆ 5ul ಕಿಣ್ವ ಸಂಯೋಗವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ) ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

1.4 ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ

①ಎಂಜೈಮ್ ಲೇಬಲ್ ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ (ಮಾದರಿಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಡಿಸ್ಅಸೆಂಬಲ್ ಮಾಡಬಹುದು ಮತ್ತು ಹಲವಾರು ಬಾರಿ ಬಳಸಬಹುದು), ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ ಎಂಬ ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲ್‌ಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ಸೀರಮ್‌ನ 100ul ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಋಣಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಧನಾತ್ಮಕ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ತಲಾ ಎರಡು ಬಾವಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಸಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಋಣಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಗಾಗಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದನ್ನು 100ul ಸೇರಿಸಿ. ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ಮುಚ್ಚಲು ಸೀಲಿಂಗ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಫಿಲ್ಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಬಾವಿಯಲ್ಲಿನ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ ಮತ್ತು 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 37 ಡಿಗ್ರಿಯಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಿ.

②ಸೀಲಿಂಗ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಫಿಲ್ಮ್ ಅನ್ನು ತೆರೆಯಿರಿ, ಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿನ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ, ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 300µl ಕೆಲಸದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರವವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ತದನಂತರ ದ್ರವವನ್ನು ಬಾವಿಯಲ್ಲಿ ಎಸೆಯಿರಿ. ಮೇಲಿನ ಹಂತಗಳನ್ನು 5 ಬಾರಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಶುದ್ಧ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದದ ಮೇಲೆ ಒಣಗಿಸಿ.

③ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 100µl ಎಂಜೈಮ್ ಕಾಂಜುಗೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ ಮತ್ತು 45 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 37 ಡಿಗ್ರಿಯಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಿ.

④ ಸೀಲಿಂಗ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಫಿಲ್ಮ್ ಅನ್ನು ತೆರೆಯಿರಿ, ಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿನ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ, ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 300µl ಕೆಲಸದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರವವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ತದನಂತರ ದ್ರವವನ್ನು ಬಾವಿಯಲ್ಲಿ ಎಸೆಯಿರಿ. ಮೇಲಿನ ಹಂತಗಳನ್ನು 5 ಬಾರಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಶುದ್ಧ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದದ ಮೇಲೆ ಒಣಗಿಸಿ.

⑤ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 100µl ತಲಾಧಾರದ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ ಮತ್ತು ಬೆಳಕಿನಿಂದ 37 ಡಿಗ್ರಿಯಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ.

⑥ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 50µl ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು 5 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಿ.

STEP 2 ಫಲಿತಾಂಶದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಯ OD450 ಮೌಲ್ಯವನ್ನು 96-ಬಾವಿ ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್‌ನಲ್ಲಿ ಓದಲಾಗುತ್ತದೆ.

2.1 ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ

ನಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಸರಾಸರಿ OD450nm ಮೌಲ್ಯ<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥5, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 ಲೆಕ್ಕಾಚಾರದ ವಿಧಾನ

ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಗೆ, ಸರಿಪಡಿಸಿದ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು S/P ಅನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡಿ:

S / P{0}}(OD_{ಮಾದರಿ}-ಓಡಿ_NC) / (OD_ಪಿಸಿ-ಓಡಿ_NC)

2.3 ಫಲಿತಾಂಶದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

ಯಾವಾಗ ಎಸ್/ಪಿ<0.15, it is judged as negative.

S/P 0.25 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಅಥವಾ ಸಮನಾಗಿದ್ದರೆ, ಅದನ್ನು ಧನಾತ್ಮಕ ಎಂದು ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಯಾವಾಗ 0.15 ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ S/P ಗೆ ಸಮಾನವಾಗಿರುತ್ತದೆ<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

ಹಾಟ್ ಟ್ಯಾಗ್ಗಳು: ಪೊರ್ಸಿನ್ ಸರ್ಕೋವೈರಸ್ ಪ್ರಕಾರ-ⅱ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಎಲಿಸಾ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್, ಚೀನಾ ಪೊರ್ಸಿನ್ ಸರ್ಕೋವೈರಸ್ ಪ್ರಕಾರ-ⅱ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಎಲಿಸಾ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಪೂರೈಕೆದಾರರು, ತಯಾರಕರು, ಕಾರ್ಖಾನೆ

ಹಿಂದಿನದು: ಮಾಹಿತಿ ಇಲ್ಲ

ಮುಂದೆ...: ಪೊರ್ಸಿನ್ ಪಾರ್ವೊವೈರಸ್ ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಎಲಿಸಾ ಕಿಟ್